公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

商品屬性

描述：與Bst 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合酶大片段相比，Bst 3.0 DNA聚合酶具有更佳的等溫?cái)U(kuò)增活性和更強(qiáng)的逆轉(zhuǎn)錄活性。無(wú)論以DNA還是RNA為模板，該酶都具有5’-3’的DNA聚合酶活性和強(qiáng)烈的鏈置換活性，但該酶5’-3’和3’-5’的外切酶活性缺失。
在以RNA為模板的LAMP實(shí)驗(yàn)中，可實(shí)現(xiàn)單酶系統(tǒng)反應(yīng)。該酶在60-65°C之間具有很好的反轉(zhuǎn)錄活性，可有效解決具有二級(jí)復(fù)雜結(jié)構(gòu)的RNA模板的反轉(zhuǎn)錄，而B(niǎo)st 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合酶大片段無(wú)此活性。

單位定義：
一個(gè)活力單位即在 65°C 條件下，30 分鐘內(nèi)催化 10 nmoldNTP 的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。
儲(chǔ)存：-20℃ 可保存 3 年。
典型的 LAMP 反應(yīng)
1. 按以下組分配制 LAMP 反應(yīng)液Bst 3.0 DNA/RNA Polymerase (32 U/μl) 0.05~0.25 μl
10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100 mM Mg2+
X μl
dNTP Mixture (10 mM each) 3.5 μl
模板 DNA/RNA 10ng~1 μg
*10X Primers 2.5μl
ddH2O Up to 25 μl
*10X Primers：16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM LoopF/B each。
2. 65°C 30~60min; 85°C 5min 失活。
使用注意事項(xiàng)：
(1) Mg2+的使用濃度為 4~10 mM 濃度，Isothermo Buffer中沒(méi)有 Mg2+，通常情況下，在 6-8 mM Mg2+條件下可獲得較好的 LAMP 結(jié)果。
(2) 有文獻(xiàn)報(bào)道加入 Tte Uvrd 解旋酶可改善 LAMP 的效果。
(3) 使用無(wú)模板 DNA 作為對(duì)照檢測(cè)擴(kuò)增的特異性。

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