公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

二、細胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。

     b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項 

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

NKB： 神經(jīng)激肽B抗體 P815細胞，肥大細胞瘤細胞 人胃癌耐藥株,SGC7901/DDP細胞 非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2

IgG2 Others Human 人 IgG2-Fc (257 Ser/Ala) 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠髓系細胞觸發(fā)受體-1(EM-1)ELISA試劑盒 AcSDKP(Mouse N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro)  小鼠N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸 96T

Neurocan： 神經(jīng)粘蛋白抗體 髓核細胞生長添加物NPCGS

SV40 MES 13小鼠腎小球系膜細胞 SV40 MES 13 in mouse glomerular mesangial cells DMEM培養(yǎng)基+5%FBS 大鼠髓系細胞觸發(fā)受體-1(EM-1)ELISA 試劑盒 AGEs  大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物 96T

Neurofascin： 神經(jīng)束蛋白抗體 RK2 Others Human 人 RK2 / k-B / KB 人細胞裂解液 (陽性對照)

LILRA5 Others Rat 大鼠 LILRA5 人細胞裂解液 (陽性對照) 人白喉抗體(Diphtheria Ab)ELISA 試劑盒 P73 protein P73抑制基因抗原 0.5mg

ILK-1： 整合素連接激酶-1抗體 CM-H031人食管上皮細胞培養(yǎng)基100mL

MA-891細胞，小鼠癌高轉(zhuǎn)移細胞 L929(成纖維細胞) 人葡萄膜黑色素細胞;UM 人白C 抗原(DR15)ELISA試劑盒 p70 S6 Kinase/P70 Beta1 p70S6Kb抗原 0.5mg

phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180)： 0酸化KB抑制蛋白激酶α抗體 TDGF1 Others Human 人 TDGF1 / CRGF 人細胞裂解液 (陽性對照)

人肝癌細胞;Hep G2 [HepG2] 人靶向核糖核酸酶()ELISA 試劑盒 PALB2(partner and locaizer of BRCA2) 癌易感基因相關(guān)蛋白2 0.5mg

MDA-MB-468人乳腺癌細胞RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 大鼠補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒 OPG(Human Osteoprotegerin)  人骨保護素 96T

phospho-P (Ser153)： 0酸化Raf激酶抑制蛋白抗體 IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細胞裂解液 (陽性對照)

SK-OV-3 人卵巢腺癌細胞 大鼠補體片斷3(C3)ELISA試劑盒 BMPR- II (Human Bone morphogenetic protein receptor II )  人骨成型蛋白受體Ⅱ 96T

RERE： 肌相關(guān)蛋白1抗體 OS-732細胞，骨肉瘤細胞(瘤株) 人細胞,SiHa細胞 人脊髓星形膠質(zhì)細胞總RNAHA-sp NA

ITGA6 & ITGB1 Others Human 人 ITGA6 & ITGB1 Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠補體蛋白4(C4)ELISA試劑盒 BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A)  人骨成型蛋白受體1A 96T