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淡竹葉探針法PCR鑒定試劑盒*

更新時間:2024-11-29

簡要描述:

淡竹葉探針法PCR鑒定試劑盒*公司相關(guān)產(chǎn)品Tryptone Agar
6-芐氨基嘌呤1214-39-7包裝 6-BA 葡萄糖天門冬素培養(yǎng)基 Glucose Asparagine Medium
6-糠氨基嘌呤525-79-1 6-Furfuryl Amipurine 葡萄糖酸鹽-雙岐桿菌鑒定 20支
6-氯嘌呤87-42-3 6-Chlorpurine

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實驗流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品名稱

淡竹葉探針法PCR鑒定試劑盒*

英文名稱

lophatheri

貨號

BH-P99426

特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 765432
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
原代肝實質(zhì)細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml外消旋西替利嗪N氧化物(非對映)rac Cetirizine N-Oxide(Mixture of Diastereomers)質(zhì)量規(guī)格:美國進口

A3細胞,人T細胞白血病細胞 轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細胞,15P-1細胞 少突膠質(zhì)細胞生長添加物OGS(3R,5S)(3S,5R) Fluvastatin  Salt質(zhì)量規(guī)格:美國進口

NCI-H2087(人非小細胞肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2(3R,5S)-(3R,5S)-Fluvastatin  Salt質(zhì)量規(guī)格:美國進口

BRL-3A(大鼠正常肝細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M038小鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL 人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16氟伐他汀Fluvastatin質(zhì)量規(guī)格:美國進口

兔主動脈平滑肌細胞;SMC克林沙星鹽酸鹽Clinafloxacin 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
大鼠大隱靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL Guanine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

GP-293人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line GP-293 DMEM+10% FBS (標(biāo)準(zhǔn)品)Guanine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

IFNA13 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 蛋白 (His 標(biāo)簽)6-6-TG/Thioguanine質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR

HOS(人骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 01群霍亂弧菌6-(標(biāo)準(zhǔn)品)6-TG/Thioguanine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)A;全反式維A;維生素A;All-Trans-Retiic Acid\Tretiin質(zhì)量規(guī)格:>98%%,USP,BR
RT4(人膀胱移行細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2頭孢唑1鈉質(zhì)量規(guī)格:>90%,BRCeftizoxime

Hacat(人永生化角質(zhì)形成細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0352HFF-1(人成纖維細胞)5×106cells/瓶×2 白牦牛皮膚細胞;Yak-2頭孢唑1(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:效價測定Ceftizoxime

小鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/9焦性沒食子酸,鄰苯三酚,焦棓酸質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%Pyrogallol

TMED1 Others Human TMED1 人細胞裂解液 (陽性對照) 曲美替尼質(zhì)量規(guī)格:>99%,MEK抑制劑Trametinib (GSK1120212)

人腸微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:UV法溶出度檢查Pasiniazid
淡竹葉探針法PCR鑒定試劑盒*人癌細胞;MDA-MB-231亞碲酸鉀100

TNFRSF19 Others Human TNFRSF19 / OY 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,4,5,6-四錄鄰本二晴 Chlorothclonil 1897-42-6

狗脂肪間質(zhì)干細胞 The dog adipose mesenchymal stem cells鹽酸胍 (常規(guī)) Guanidine  (99.0%) 1950-1-1 100G 通用試劑

HOPC-os細胞,人少突膠質(zhì)前體細胞 構(gòu)巢曲霉 人胚腎細胞;293 [HEK-293]
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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