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羅漢果染料法PCR鑒定試劑盒保存

更新時間:2024-11-28

簡要描述:

羅漢果染料法PCR鑒定試劑盒保存公司相關(guān)產(chǎn)品 Tryptone-Yeast Extract-Glucose Broth
2-萘磺酸鈉532-02-5包裝 2-naphthalenesulfonate 胰蛋白胨膽鹽瓊脂(TBA)(ISO9038-1-2000)
達(dá)旦黃1829-00-1 Titan yellow 胰蛋白胨膽鹽瓊脂 Tryptone Bile Agar

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儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品名稱

羅漢果染料法PCR鑒定試劑盒保存

英文名稱

momordicae

貨號

BH-P99308

特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 765432
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進(jìn)行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進(jìn)行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來自NIH3T3);PA12神經(jīng)肽Y2-36),人,大鼠Neuropeptide Y (2-36) (human,rat)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

GGT1 Others Rat 大鼠 GGT1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 神經(jīng)肽Y22-36Neuropeptide Y (22-36)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL神經(jīng)肽Y3-36),豬Neuropeptide Y (3-36)(porcine)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

M1細(xì)胞,小鼠白血病細(xì)胞 脆弱擬桿菌 新生牛眼Ten's囊成纖維細(xì)胞;NBTF骨鈣素(7-19),人Osteocalcin (7-19) (human)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)成骨生長肽Osteogenic Growth Peptide質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
/溶液P/SL-脯氨酰胺L-Prolinamide質(zhì)量規(guī)格:0.98

VEGFA Others Canine VEGF / VEGFA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-(標(biāo)準(zhǔn)品)L-Glutamic acid質(zhì)量規(guī)格:>99%(TLC),標(biāo)準(zhǔn)品

人急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞;Jurkat, Clone E6-1L-(sigma)L-Glutamic acid質(zhì)量規(guī)格:>99%,Sigma分裝

H7402細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞,EAC細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-76DL-DL-Glutamic acid mohydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,水合物

MGC80-3(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2肌氨酸Sarcosine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO C1008 (E6) 中國倉鼠肺細(xì)胞,V79細(xì)胞 HCCC-9810(膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞)分子篩, 5 Å(干燥劑用)質(zhì)量規(guī)格:干燥劑用Molecular sieves, 5 Å

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY1008分子篩, 5 Å(pellets,3-5 mm)質(zhì)量規(guī)格:pellets,3-5 mmMolecular sieves, 5 Å

CD27 Others Mouse 小鼠 CD27 / TNFRSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRGliclazide

CM-R029大鼠腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品Gliclazide

CDH18 Others Cymolgus 食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRGlyburide/Gliebenclamide
羅漢果染料法PCR鑒定試劑盒保存ARPE-19(人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC diatrizoate dihydrate

CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氟鋁酸鈉(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR fluoroaluminate

兔腎細(xì)胞;RK-13馬尿酸鈉(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR hippurate

IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B H
實驗流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

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