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T4 DNA連接酶9015-85-4

更新時間:2024-11-27

簡要描述:

T4 DNA連接酶9015-85-4分子式、分子量、結構式、COA(產品質量報告)、級別、規格、含量、熔點、性狀、用途、保存、純度、折光率、密度、沸點、庫存量等,請咨詢銷售人員。

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各位從事科研工作的小伙伴們,實驗中所用到的試劑、配制試劑的液體,有時可能是實驗成敗的關鍵,因此大家在使用時一定要留意各種試劑的級別。原則上講,純度越高越好,但是價格也就越高,所以要根據各自的需要選擇合適的品質,避免不必要的浪費!

T4 DNA連接酶9015-85-4
英文名稱:T4 DNA Ligase 
:9015-85-4
分子量:55.3kDa,單體
級別:BR
來源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
活性定義:是指在ATP-PPi交換反應中,37℃、30分鐘內將1nmol [32PPi]轉換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1個weiss單位相當于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位:20ul反應體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分鐘內連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產物所需的酶量) 
抑制劑:當反應體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時,可強烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意:T4 DNA Ligase與DNA結合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現象,電泳前需處理樣本或分子量標準。樣本處理如下:樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存;轉化時,連接產物的體積不得超過感受態細胞體積中的10%;電轉化之前,先用方抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase,然后經乙醇沉淀純化抽提產物
T4 DNA連接酶9015-85-4質量控制:測試表明無內切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測:粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀(以下信息僅供參考):液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復合體中缺口的修復;連接酶介導的RNA檢測;位點特異性突變;擴增片段長度多態性
保存: -20°C

產品規格
GR:優級純。主成份含量很高、純度很高,適用于精確分析和研究工作,有的可作為基準物質.
AR:分析純。主成份含量很高、純度較高,干擾雜質很低,適用于工業分析及化學實驗。
CP:化學純。主成份含量高、純度較高,存在干擾雜質,適用于化學實驗和合成制備。
LR:實驗純。主成份含量高、純度較差,雜質含量不做選擇,只適用于一般化學實驗和合成制備。
BR:生化試劑。用于配制生物化學檢驗試液,和生化合成。質量指標注重生物活性雜質。可替代指示劑和有機合成。
BS:生物染色劑。適用于配制生物標本染色液。質量指標注重生物活性雜質。可替代指示劑和有機合成。
T4 DNA連接酶9015-85-4Ind:顯色劑。
HPLC:適用于高壓液相色譜的試劑。
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試劑開瓶的問題
隨著全自動生化分析儀的普及,“開瓶穩定性”也隨之受到了大家的重視,但是就目前有的試劑方法學來講,還達不到人們所要求的試劑開瓶后在儀器內放很長時間不需要定標,比如ALP、TP、GSP等PH為堿性的試劑,開瓶后試劑會吸收空氣中的二氧化碳,使試劑本身的PH值下降,如果長時間開瓶不定標或校準,會使檢測結果發生偏離,在國外有的項目有明文規定,必須72小時之標,比如BUN。但是在國內的某些實驗室為了方便,很長時間都不作校準,導致測定結果的不準確。解決辦法:了解試劑的特性,及時對部份項目進行校準,對于每天標本量不多的醫院,可按1~2天的用量取用試劑放入儀器。

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