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Y190 感受態細胞100ul*50

更新時間:2024-11-23

簡要描述:

Y190 感受態細胞100ul*50菌株一種常用于質粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的產物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實現a互補,可用于藍白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩定和高純度質粒DNA的提取。

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Y190 感受態細胞100ul*50以下是的訂購信息儲存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農桿菌感受態于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態時插入冰中。
2.每100 μl感受態加入0.01-1 μg質粒DNA(轉化效率較高,*次使用前做預實驗確定所加質粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
3. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養基,于28℃振蕩培養2~3小時。
Y190 感受態細胞100ul*504. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養箱培養2-3天
注意事項
1. 加入質粒時體積不應大于感受態體積的1/10;質粒不純或存在乙醇等有機物污染,轉化效率急劇下降;質粒增大一倍,轉化效率下降一個數量級。
2. 混入質粒時應輕柔操作。轉化高濃度的質??上鄳獪p少終用于涂板的菌量。
Y190 感受態細胞100ul*503. 平板上陽性克隆密度過大時,由于營養不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應減少質粒用量。
4. 濃度不應高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農桿菌生長,會降低其生長速度和轉化效率。本公司感受態計算轉化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉化效率降低到1/2。
5. 培養基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農桿菌;根據所用菌株抗性加入Ti質粒篩選抗生素可防止Ti質粒丟失,但Ti質粒篩選抗生素不利于農桿菌的轉基因操作,所以一般培養農桿菌時不考慮這些抗生素,Ti質粒丟失的概率極低(可以忽略)。

 IMA 人缺血修飾白蛋白 規格: 48T/96T

 ALD 人醛縮酶 規格: 48T/96T

 ALD 人醛固酮 規格: 48T/96T

 i-PTH 人全段甲狀旁腺素 規格: 48T/96T

 ASGPR 人去唾液酸糖蛋白受體 規格: 48T/96T

 NA 人 規格: 48T/96T

 FK 人趨化因子 規格: 48T/96T

 SRB/CD36 人清道夫受體B 規格: 48T/96T

 SM 人鞘磷脂 規格: 48T/96T

 Dsg-1 人橋粒芯糖蛋白-1 規格: 48T/96T

 Hyl 人羥賴氨酸 規格: 48T/96T

 OH-PYD 人羥基膠原吡啶交聯 規格: 48T/96T

 HRGP 人羥糖蛋白 規格: 48T/96T

 Hyp 人羥 規格: 48T/96T

 Dyn 人強啡肽 規格: 48T/96T

 LMP-1 人潛伏膜蛋白1 規格: 48T/96T

 Pro-ANP 人前心鈉肽 規格: 48T/96T

 Pro-ANP 人前心鈉肽 規格: 48T/96T

 PSA 人前列腺特異性抗原 規格: 48T/96T

 PAP 人前列腺酸性磷酸酶 規格: 48T/96T

 PGF 人前列腺素F 規格: 48T/96T

 PGE2 人前列腺素E2 規格: 48T/96T

 PGE1 人前列腺素E1 規格: 48T/96T

 PTGDS 人前列腺素D合成酶 規格: 48T/96T

 PGDS 人前列腺素D合成酶 規格: 48T/96T

 PGI 人前列環素 規格: 48T/96T

 PCP 人前膠原C端肽酶 規格: 48T/96T

 PA 人前白蛋白 規格: 48T/96T

 CALLA 人普通急性淋巴細胞白血病抗原 規格: 48T/96T

 GLUT3 人葡萄糖轉運蛋白3 規格: 48T/96T

 GLUT1 人葡萄糖轉運蛋白1 規格: 48T/96T

 GIP 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽 規格: 48T/96T

 GOD 人葡萄糖氧化酶 規格: 48T/96T

 GKRP 人葡萄糖激酶調節蛋白 規格: 48T/96T

 GCK 人葡萄糖激酶 規格: 48T/96T

Y190 感受態細胞100ul*50 GPI 人葡萄糖6磷酸異構酶 規格: 48T/96T

 SPA 人葡萄球菌蛋白A 規格: 48T/96T

 Tetanus Ab 人破傷風抗體 規格: 48T/96T

 ODF 人破骨細胞分化因子 規格: 48T/96T

 Prednisolone 人龍 規格: 48T/96T

 SMM 人平滑肌肌球蛋白 規格: 48T/96T

 Syk 人脾臟激酶 規格: 48T/96T

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