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K599 感受態細胞100ul*50

更新時間:2024-11-23

簡要描述:

K599 感受態細胞100ul*50菌株一種常用于質粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的產物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實現a互補,可用于藍白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩定和高純度質粒DNA的提取。

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K599 感受態細胞100ul*50以下是的訂購信息儲存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農桿菌感受態于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態時插入冰中。
2.每100 μl感受態加入0.01-1 μg質粒DNA(轉化效率較高,*次使用前做預實驗確定所加質粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
3. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養基,于28℃振蕩培養2~3小時。
K599 感受態細胞100ul*504. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養箱培養2-3天
注意事項
1. 加入質粒時體積不應大于感受態體積的1/10;質粒不純或存在乙醇等有機物污染,轉化效率急劇下降;質粒增大一倍,轉化效率下降一個數量級。
2. 混入質粒時應輕柔操作。轉化高濃度的質粒可相應減少終用于涂板的菌量。
K599 感受態細胞100ul*503. 平板上陽性克隆密度過大時,由于營養不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應減少質粒用量。
4. 濃度不應高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農桿菌生長,會降低其生長速度和轉化效率。本公司感受態計算轉化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉化效率降低到1/2。
5. 培養基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農桿菌;根據所用菌株抗性加入Ti質粒篩選抗生素可防止Ti質粒丟失,但Ti質粒篩選抗生素不利于農桿菌的轉基因操作,所以一般培養農桿菌時不考慮這些抗生素,Ti質粒丟失的概率極低(可以忽略)。

 Amylin 大鼠胰淀素 規格: 48T/96T

 ICA 大鼠胰島細胞抗體 規格: 48T/96T

 IAA 大鼠胰島素自身抗體 規格: 48T/96T

 PI 大鼠胰島素原 規格: 48T/96T

 IGFBP-4 大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4 規格: 48T/96T

 IGFBP-3 大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白3 規格: 48T/96T

 IGFBP-2 大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2 規格: 48T/96T

 IGFBP-1 大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1 規格: 48T/96T

 IGF-2 大鼠胰島素樣生長因子2 規格: 48T/96T

 IGF-1 大鼠胰島素樣生長因子1 規格: 48T/96T

 ISR-β 大鼠胰島素受體β 規格: 48T/96T

 INS 大鼠胰島素 規格: 48T/96T

 TAP 大鼠原激活肽 規格: 48T/96T

 trypsin 大鼠 規格: 48T/96T

 NOS 大鼠一氧化氮合成酶 規格: 48T/96T

 FA 大鼠 規格: 48T/96T

 OLAb 大鼠氧化低密度脂蛋白抗體 規格: 48T/96T

 OxLDL 大鼠氧化低密度脂蛋白 規格: 48T/96T

 NADPH 大鼠腺嘌呤二核苷酸磷酸 規格: 48T/96T

 N-AChR 大鼠煙堿型乙酰受體 規格: 48T/96T

 PF-4/CXCL4 大鼠血小板因子4 規格: 48T/96T

 PF-3 大鼠血小板因子3 規格: 48T/96T

 PDGFsR-α 大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α 規格: 48T/96T

 PDGF-BB 大鼠血小板衍生生長因子BB 規格: 48T/96T

 PDGF-AB 大鼠血小板衍生生長因子AB 規格: 48T/96T

 PDGF 大鼠血小板衍生生長因子 規格: 48T/96T

 TPO 大鼠血小板生成素 規格: 48T/96T

 GP-ⅡbⅢa 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa 規格: 48T/96T

 PAF 大鼠血小板活化因子 規格: 48T/96T

 TSP-1 大鼠血小板反應蛋白/敏感蛋白1 規格: 48T/96T

 FDP 大鼠血纖蛋白原降解產物 規格: 48T/96T

 Fbg 大鼠血纖蛋白原 規格: 48T/96T

 TXB2 大鼠血栓素B2 規格: 48T/96T

 TpP 大鼠血栓前體蛋白 規格: 48T/96T

 TM 大鼠血栓調節蛋白 規格: 48T/96T

 K599 感受態細胞100ul*50CH50 大鼠血清總補體 規格: 48T/96T

 NO 大鼠血清一氧化氮 規格: 48T/96T

48T/96T

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