更新時間：2024-11-17
NCI-H446人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：CL-0140LLC(小鼠肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)ELISA 試劑盒 IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗IgG 0.1mlGPR43： G蛋白偶聯(lián)受體43抗體 SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細(xì)胞 HumanHAoSMC Pellet 人主動脈平滑肌細(xì)胞團
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
1、細(xì)胞傳代：
1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時，棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用 PBS 清洗細(xì)胞一次；
2）添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)
液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；
3）棄上清，沉淀細(xì)胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸，然后按 1:2 比例進行分瓶傳代，最后放入 37℃，5%CO2細(xì)胞
培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
NCI-H446人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | 1×106 | P-X889 |
一、商品介紹：
產(chǎn)品名稱 | NCI-H446人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 |
種屬 | 人 |
細(xì)胞別稱 | H446; H-446; NCI-446; NCIH446；人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 |
年齡性別 | 男；61歲 |
生長特性 | 半貼壁生長 |
組織來源 | 肺 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
背景簡介 | NCI-H446細(xì)胞株從一位小細(xì)胞肺癌患者的胸水中建立。細(xì)胞的原始形態(tài)并不具有小細(xì)胞肺癌特征。這個細(xì)胞株是小細(xì)胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種，表達神經(jīng)元的烯醇酶和腦部肌酸激酶同功酶。脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。 |
生物安全等級 | 1 |
細(xì)胞規(guī)格 | 1×106 |
支原體檢測 | 無 |
基因表達情況 | |
保藏機構(gòu) | ATCC; HTB-171 |
培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10% FBS+1%PS |
培養(yǎng)條件 | 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
倍增時間 |
2、細(xì)胞凍存：
1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時，棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用 PBS 清洗細(xì)胞一次；
2）添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終
止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；
3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序
降溫盒可直接放入-80℃。
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
Nogo R： 軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體 CCL5 Others Human 人 CCL5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CM-M023小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 大鼠神經(jīng)肽Y受體Y2(NPY2R)ELISA試劑盒 ANF(Human atrial natriuretic factor) 人心納素 96T
NAV3： 神經(jīng)元引導(dǎo)蛋白3抗體 大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)
TT(人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-H838 [H838](人肺癌細(xì)胞) 大鼠神經(jīng)肽Y受體Y1(NPY1R)ELISA試劑盒 GSK(Mouse glycogen synthase kinase) 小鼠糖原合成酶激酶 96T
NCR1： 細(xì)胞毒性受體NK-p46抗體 恒河猴腎細(xì)胞;RM-3
IL-1 Beta： 白介素1β/IL-1β抗體 人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823
SPC-A-1(人肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FSTL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人EB病毒IgG(EBv IgG)ELISA 試劑盒 TRA16 (Testicular orphan nuclear receptor-4 (TR4)-associated protein) 激素受體相關(guān)蛋白/孤兒素受體相關(guān)蛋白(抗原) 0.5mg
IL-2： 白介素2抗體 氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
IL8 Protein Human 重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 標(biāo)簽) 人EB病毒IgA(EBv IgA)ELISA 試劑盒 TRADD(TNF receptor 1 associated via death domain) 有死亡區(qū)的壞死因子受體1相關(guān)蛋白抗原 0.5mg
IL-2(H2E4)： 白細(xì)胞介素-2單克隆抗體 TNFRSF6B Others Human 人 DCR3 / TNFRSF6B 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
NCI-H446人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞BRL 大鼠肝細(xì)胞 大鼠白介素27(IL27)ELISA試劑盒 L-LDH(Human L-Lactate Dehydrogenase) 人L-乳酸脫氫酶 96T
RNF211： 環(huán)指蛋白211抗體 CTLL-2細(xì)胞，小鼠T細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,9L-B細(xì)胞 人絨毛間葉成纖維細(xì)胞RNAHVMF miRNA5 μg
XPNPEP2 Others Human 人 XPNPEP2 / X-Pro aminopeptidase 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠白介素27(IL-27)ELISA 試劑盒 ASM(Human acid sphingomyelinase) 人酸性神經(jīng)鞘0脂酶 96T
RENBP： 腎素結(jié)合蛋白抗體 人成骨肉瘤細(xì)胞;MG-63
CL-0126JAR(人胎盤絨毛膜癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠白介素26(IL-26)ELISA試劑盒 ALOX-5(Human arachidonate 5-lipoxygenase) 人花生四烯酸5脂加氧酶 96T
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
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